AGS/DDP人胃癌顺铂耐药株

组织来源 ： 胃

疾病  ： 胃腺癌 

简 介 ： The AGS细胞株源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。 在下述培养基中植板率为34%。 支原体感染后消除。

形态  ： 上皮细胞样

生长特征 ：  贴壁生长

倍增时间 ：  ~24h

致瘤性 ：  Yes, in athymic BALB/c mice.

 STR   ： D5S818: 9, 12 D13S317: 12 D7S820: 10, 11 D16S539: 11, 13 vWA: 16, 17 TH01: 6, 7 Amelogenin: X

TPOX: 11, 12 CSF1PO: 11, 12

培养条件  ： 气相 ：空气 ，95% ；二氧化碳 ，5%。 温度 ：37摄氏度 ，培养箱湿度为70%-80%。

冻存条件  ： 冻存液 ：90%FBS ，DMSO 10% , 或使用非程序冻存液 ：官网货号JY-H040

完全培养基配置 ：  RPMI1640培养基 ；10%胎牛血清 ；0.5ug/ml DDP ；1%双抗

产品使用  ： 仅限于科学研究 ，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

传代比例/细胞消化： 1-2 - 1 : 3传代 ，消化2-3分钟 ，

细胞接收处理流程 ：

1 ：观察有无破损漏液情况 ，如有请拍照及时联系客服。

2 ：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ，观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静止2-3小时稳定 细胞状态。

3 ：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。

4 ：产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。

5 ：若产品有异常或其他疑问 ，可随时联系客服 ；转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式

1. 收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2. 镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象， 方便后续售后处理。

3.消毒后，更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶。

4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，

首次传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定，若不确定 可联系技术支持）；若细胞密度不到 80%则可继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。

5. 由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代（参考附件），或及时联系技术支持进行指导传代。

贴壁细胞传代：
1. 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；

2. 从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层，前后摇晃容器数次

3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的胰酶；胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml)；

4. 将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异）；

5. 在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%，可将孵育时间延长几分钟，每 30 秒钟检查一次解离情况；

6. 细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽；加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面数次，使培养基分散；

7. 将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟（请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；

8. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶，将其放入培养箱前应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖）。

悬浮细胞传代：1.将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min，收集上清，加 1- 2ml 完全培养基重悬，按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中，补充5-8ml/瓶新的完全培养基 ，最后放入细胞培养箱中培养。