金少源(上海)生物科技有限公司
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产品描述
细胞污染高效清除剂旨在全面保护细胞免受微生物污染，不仅可以显著清除支原体污染，还可有效消除真菌和细菌的污染，在整个培养过程中均可使用，可加入培养基或用于组织清洗，只需1~3天就可显著抑制真菌、细菌、支原体的增殖，1~2周左右即可清除污染，本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，完美兼具高效和广谱清除细胞污染物的能力，对细胞生长几乎无影响，最大程度上挽救您的珍贵细胞。
产品名称 | 规格 | 储存条件 | 有效期 |
细胞污染高效清除剂，2000 ×Contaminant Efficient Removal Agent 2000 × | 1ml | -20℃避光 | 2年 |
产品优势
1、高效性，1天即可有效抑制真菌、细菌、支原体、黑胶虫的增殖；
2、高特异性，特异性清除细胞培养过程中的污染物；
3、无耐药性，活性成分为多肽类，不会产生耐药性；
4、高利用率，未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用；
5、高安全性，对细胞几乎无毒性，已在上百种细胞上验证。
质量控制
1、通过支原体、真菌、支原体、内毒素检测。
2、通过渗透压、pH 检测。
3、通过产品性能检测。
运输及保存方法
冰袋运输，-20℃避光保存，保质期2年。
使用方法
从-20℃冰箱内取出细胞污染高效清除剂，将试剂管瞬时离心（3000rpm，3~5s）后放置于EP管架上，用75%的酒精喷洒试剂管的表面，在生物安全柜中进行无菌操作。
清除细胞污染操作规程
以T25细胞培养瓶为例：
对于已检测或怀疑有支原体污染的细胞，在细胞培养基中加入适量支原体高效清除剂，通常推荐使用的稀释倍数为2000×，如：6 mL的细胞培养基加入3 μL的支原体高效清除剂混匀。连续加药培养1~2周即可有效清除支原体污染。
若支原体污染较严重，可酌情增加药物浓度以提高清除支原体的效率，推荐尝试最小稀释倍数、 中间稀释倍数、最大稀释倍数三个浓度进行测试。以细胞系（成纤维样）为例，建议将细胞分为三份， 分别采用500×、1000×、2000×三个浓度进行支原体清除。若500×对细胞生长无明显影响，可采用500× 浓度快速清除支原体，若500×对细胞生长有明显影响，则采用1000×浓度清除支原体，连续加药培养 1~2周（或传代3次）后，检测是否还存在支原体污染。如果还存在支原体污染，可继续培养1周。
细胞类型 | 细胞对药物敏 | 细胞举例 | 建议稀释倍数 |
细胞系（类成纤维样） | ☆ | 293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1 | 500×~2000× |
细胞系（上皮样） | ☆☆ | MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC | 1000×~2000× |
原代细胞（成纤维样） | 成纤维细胞、间质细胞 | ||
原代细胞（上皮样） | ☆☆☆ | 上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞 | 1500×~2000× |
干细胞（成纤维样） | 间充质干细胞 | ||
胚胎干细胞（克隆样） | ☆☆☆☆ | H1、H9、iPS | 2500×~ 4000× |
注 意：可参考下表选择稀释倍数，达到最佳清除效果。
预防细胞污染操作规程
以T25细胞培养瓶为例：
若细胞需连续培养，建议每2~3周进行定期预防。在细胞培养基中加入适量细胞污染高效清除剂，通常推荐使用的稀释倍数为3000×，如: 6mL的细胞培养基加入2μL的细胞污染高效清除剂混匀。连续加药培养1周，可有效预防细胞的真菌、细菌、支原体、黑胶虫污染。
注 意：可参考下表选择稀释倍数，有效预防支原体污染。
细胞类型 | 细胞对药物敏感度 | 细胞举例 | 建议稀释倍数 |
细胞系（类成纤维样） | ☆ | 293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1 | 3000× |
细胞系（上皮样） | ☆☆ | MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC | 3000× |
原代细胞（成纤维样） | 成纤维细胞、间质细胞 | ||
原代细胞（上皮样） | ☆☆☆ | 上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞 | 3000× |
干细胞（成纤维样） | 间充质干细胞 | ||
胚胎干细胞（克隆样） | ☆☆☆☆ | H1、H9、iPS | 6000× |
清洗组织操作规程
对于易污染的消化系统、生殖系统、泌尿系统、皮肤系统的组织进行原代细胞培养，组织的无菌是细胞培养的先决条件。分离目的组织后，用PBS将血液、毛发、污垢清洗干净。配制适量含有1000×细胞污染高效清除剂的PBS，如: 10mL的PBS加入10μL的细胞污染高效清除剂混匀。用含药PBS浸泡组织2~5min，浸泡清洗3次，即可有效预防真菌、细菌、支原体、黑胶虫污染。
实验流程图
温馨提示
1、使用本试剂前请仔细阅读说明书；
2、本产品经0.1μm 过滤除菌，使用本产品时无需过滤，可直接加入培养基使用；
3、本试剂具有专利技术，-20℃保存时不冻结，使用时无需解冻，从-20℃取出即可使用；
4、为了发挥最好的药效，含药培养基建议现配现用，如果加药培养基未用完，于4℃冰箱中避光保存，2周内用完，使用培养基前需预热至37℃；
5、贴壁细胞换液或传代前，弃去旧的培养基，用含1000×细胞污染高效清除剂的PBS轻轻冲洗细胞表面2次。悬浮细胞、贴壁不牢的细胞、半贴半悬细胞换液或传代前，可利用微生物直径小于细胞直径的特点，采用150g（或900rpm）低速离心5mins，弃去旧的培养基，再用含1000×细胞污染高效清除剂的PBS轻轻冲洗细胞2次；
6、用含药PBS清洗细胞后，加入含有细胞污染高效清除试剂的新鲜完全培养基（传代后铺细胞需更换为新的瓶/板），1天换液1次， 连续加药7天，或者2天换液1次，连续加药7~14天，若细胞污染非常严重时，需增加换液频率和延长处理时间；
7、若细胞污染严重，且需要快速清除污染时，即可采用高浓度药物（500×~1000×）进行清除，传代后，为了防止药物影响细胞贴壁，建议待大部分细胞贴壁后再加入药物，即先用完全培养基重悬细胞，铺瓶，0.5~2 h后在培养基中加入对应稀释倍数的细胞污染高效清除剂，轻轻混匀，放入培养箱继续培养；
8、如遇个别细胞对本试剂敏感，细胞生长速度明显受影响时，建议减量使用或进行稀释度测试；
9、细胞污染高效清除剂处理后，会有很好的预防和清除效果，但是如果环境或使用试剂中仍有污染源存在，细胞可能会再次污染，因此需做好适当的预防措施；
10、加入本产品进行污染物预防和清除时，无需添加双抗（青霉素-链霉素）；
11、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
12、本产品仅供科研实验使用，不得用于诊断或治疗。
