金少源(上海)生物科技有限公司
- 4008-723-722
细胞名称 | |
细胞描述 | 人肝动脉内皮细胞分离自肝动脉组织；在胚胎期，肝脏有3条动脉供血，分别来源于胃左 动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉，这3条动脉分别供应肝脏的不同部位。出生后，一般保 留一条动脉，大部分为起源于腹腔动脉的动脉，由其分出左、右肝动脉供应左、右半肝。 偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的 情况，如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%)，起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动 脉(10%)，而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。 此外，还有5%像胚胎期一样，3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为 迷走肝动脉，如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时，此种异位起源的肝动脉称替代 动脉，如果在常见肝动脉类型外，还有一支这种异位起始的动脉供应肝脏的一部分血流， 这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉内皮细胞是衬于肝动脉内表面的单层扁平上皮，在炎症时 高表达黏附分子，与血流中白细胞表面黏附分子相互作用，从而介导白细胞穿越血管壁， 亦属一类非专职抗原提呈细胞。它们吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织，还参与集体免 疫活动，包括：①血管收缩及血管舒张，从而控制血压；②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶 解)；③动脉硬化；④血管生成；⑤炎症及肿胀(浮肿)；⑥内皮细胞亦控制一些物质，如白 血球进出血管。 |
细胞规格 | 5x10⁵cells/T25或1mL冻存管 |
细胞来源 | 人 |
细胞品牌 | 金少源生物 |
组织来源 | 肝动脉组织 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 内皮细胞样 |
包被条件 | PLL(0.1mg/ml)，明胶(0.1%) |
传代特性 | 可传2-3代 |
传代比例 | 1:2 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
方法简介
金少源实验室分离的人肝动脉内皮细胞采用混合酶消化法结合差速贴壁法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
金少源实验室分离的人肝动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人肝动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用金少源配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
人肝动脉内皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈内皮细胞样，在金少源技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1、取出T25细胞培养瓶
用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2、贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3、细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3) 经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)；
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4、细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4、建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和金少源技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5、该细胞只可用于科研
1) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核；
2) 本产品未通过用于活体诊断的审核；
备 注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考。
